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(新编)转基因基本步骤

(新编)转基因基本步骤

转基因基本步骤稻快速转化的培养基成分,N6D 培养基用于愈伤组织诱导和筛选,2N6-AS 为共培养培养基,AAM 用于配制农杆菌浸染液,RE-III 为分化培养基,HF 为生根培养基,AB 培养基用于农杆菌的活化。其中,配制固体培养基时,固定剂使用0.4%的Gerite。1.5.2 种子的消毒(1)水稻成熟种子去壳;(2)置70%乙醇1min,弃乙醇,用无菌水清洗5 次;(3)在每50ml 的2.5%次氯酸钠溶液中滴1 滴吐温20 混匀,然后放入乙醇处理过的水稻种子,浸泡15min,无菌水清洗5 次;(4)在2.5%次氯酸钠溶液中再灭菌15min,无菌水清洗5 次。1.5.3 种子的接种和愈伤组织诱导将灭菌后的成熟种子平摆于诱导培养基上,在常光照、32条件下培养5-8d。1.5.4 浸染液的制备(1)取出1.4 中所保存的含有目标质粒的单克隆,吸取50μl 保菌液均匀涂布于固体AB 培养基上,AB 培养基中含50mg/L 卡那霉素和50mg/L 利福平,28条件下培养2-3d;(2)刮取AB 培养基上的农杆菌,用AAM 重悬农杆菌,用AAM 稀释至OD600 为0.1。1.5.5 愈伤组织侵染和共培养(1)取出诱

转基因技术发展历程

转基因技术发展历史1945年首次使用分子生物学这一术语,主要指针对生物大分子的化学和物理结构的研究。生物学经历了一个漫长的研究历程,最早人们从研究动物和植物的形态、解剖和分类开始,以后进一步研究细胞学、遗传学、微生物学、生理学、生物化学,进入细胞水平的研究。到20世纪中叶以来,生物学以生物大分子为研究目标,分子生物学开始形成了独立的学科。分子生物学是针对所有生物学现象的分子基础进行研究。这一术语由WillianAstbury于1945年首次使用,主要指针对生物大分子的化学和物理结构的研究。1871年, Miescher从死的白细胞核中分离出DNA。1871年, Miescher从死的白细胞核中分离出DNA。1928年, Griffith发现肺炎链球菌的无毒菌株与其被杀死的有毒菌株混合,即变成致病菌株。1944年Avery等发现从强致病力的S型肺炎链球菌中提取的DNA能使致病力弱的R型转化成S型。如果加入少量DNA酶,这种转化立即消失,但加入各种蛋白水解酶则不能改变这种变化。这一著名的实验证明了引起细菌遗传改变的物质为DNA。

转基因的方法

显微注射原核制作转基因小鼠如同G o r d e n 等(19 5 0)报道过的,标准方法是显微注射小鼠胚胎。取交配后第2 天的小鼠胚胎,将胚胎清洁后放置于操作显微镜。 在此阶段两个配子融合,但细胞核(称为原核)仍然是分离的并容易看到。用一支玻璃细针将D N A 溶液往入精原核(被选者部分是由于技术的原因),然后将胚胎移入假孕雌性小鼠子宫内(胚胎在移植的前夜可允许在培养基内生长)。从显微注射到获得离乳的、阳性转基因小鼠的时间至少需7 周。D N A 水平的状况:显微注射法同样可以从遗传学(即D N A)的角度来阐述。单倍体的基因组被含有单个基因的游离D N A 分子的大约2 0个复制品所围绕。多数游离的D N A 由于本身结构的原因而被降解,游离的D N A 必须与寄主的基因组相结合才能被复制,从而传送给子细胞。结合是随机的。重要的结果是:1)经显微注射后的基因参加到寄主基因组并作为其附加物;2)寄主基因组是不发生量变的(即D N A 不受损失)。 这种植入的基因被称为转基因。应用:显微注射法可概括为:一种附加的基

转基因原理

转基因技术的原理是将人工分离和修饰过的优质基因,导入到生物体基因组中,从而达到改造生物的目的。转基因技术的理论基础来自进化论的分子生物学。基因片段可以源自特定生物的基因组中所需的靶基因或来自特定序列人工合成的DNA片段。将DNA片段转移到特定生物体中,与它们自己的基因组重组,然后从重组体中人工选择代数,以获得具有特定遗传性状稳定表现的个体。该技术可以使重组生物增加所需的新特性并培育新品种。常用的植物转基因方法:1、农杆菌介导转化法2、基因枪介导转化法3、花粉管通道法常用的动物转基因技术:1、核显微注射法2、精子介导的基因转移3、核移植转基因法转基因技术与传统技术的关系过去的几千年里农作物改良的方式主要是对自然突变产生的优良基因和重组体的选择和利用,通过随机和自然的方式来积累优良基因。转基因技术与传统技术是一脉相承的,其本质都是通过获得优良基因进行遗传改良。但在基因转移的范围和效率上,转基因技术与传统育种技

转基因技术操作

Tankertanker Design转基因技术操作Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design目录CONTENTSTankertanker Design载体及相关工具结扎雄鼠显微注射胚胎移植后代观察Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design相关工具准备载体介绍Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design注: 此慢病毒质粒载体的全长8860bp。由多种功能元件组成,其中包括5‘端和3’端的长末端重复序列(LTR),含有启动子、增强子、整合信号及多聚腺苷化信号等调控序列;CMV启动子能够在宿主细胞中持续表达外源基因的作用,同时能驱动的绿色荧光蛋白(eGFP)报告基因eGFP ,可用于感染效率的检测;稳定筛选标记嘌呤霉素抗性基因Puromycin;复制起点pUCori以及氨苄青霉素抗性基因Amp组件等。Tankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker DesignTankertanker Design玻璃毛细吸管(移卵针)制作:1.双手持毛细玻璃管,将其中部在酒精灯上进行烧灼加热,当玻璃管中部变红并充分软化时,从火焰上离移开并快速向两侧外拉

转基因科普知识

外,国家统计局在2008 年才开始全国范围内的电子商务普查,对农村电子商务的关注更少,成果主要是针对电子商务,且未得到成熟的研究成果。从国际研究趋势来看,我国必须建立官方的农村电子商务发展水平测度体系,以下是几点建议:(1)从不同角度对农村电子商务发展进行测评,在进行指标体系构建过程中注意全方面覆盖;(2)从国家层面上,建立完善的农村电子商务数据库,统一衡量口径,开展宏观、微观数据的收集汇总、调查统计工作;(3)研究结果应具备静态与动态可比性,强调测度结论在经济规律作用下如何更有效促进农村经济发展。参考文献:1POOLE.Washington DC:paper Presented at the USDA Outlook Fo-rum,2001:22 23.2汪向东,衡量我国农村电子商务成败的根本标准J.中国信息界,2011(3):5 7.3邱淑英,纪晓萃,基于农村经济发展新思路中电子商务的应用研究J企业导报. 2012(4)155 156.4石全胜,余若雪,蹇洁. 农村电子商务可持续发展模式探讨J商业经济研究,2018(12),80 83.5邱碧珍,中国农村电子商务模式

转基因的基础知识

核心原理是将目标基因(如抗病基因、抗虫基因、提高营养价值等)从一个生物体(供体生物)分离并插入到另一个生物体的基因组中(受体生物),从而改变受体生物的基因组成。这一过程能够使受体生物获得新的功能,例如抵抗特定病害、耐受农药、提高产量、增强营养价值等。转基因技术广泛应用于农业、医药、环境保护等领域,对人类生活产生了深远影响。1.1 转基因的定义转基因(Genetic modification)是指通过生物技术手段介入或修改生物体的遗传物质,通常涉及将特定的基因或DNA片段从一种生物体转移至另一种生物体。其主要目的在于赋予生物体新的性状或能力,解决实际问题,比如提高作物产量、增强抗性(如抗病虫害和耐除草剂)、改进食品营养、以及改善工业用微生物的生产效率等。转基因技术可应用于多种生物,包括伴侣动物、作物、宠物乃至微生物。这种技术通常借助一种或多种生物工程技术实现,包括但不限于基因克隆、DNA重组、基因枪技术、农杆菌转化、电穿孔以及病毒

转基因-简单科普

转基因食品genetically-modified foods利用分子生物学技术,将某些生物的基因转移到农作物中去,改造生物的遗传物质,使其在性状、营养品质、消费品质方面向人类所需要的目标转变,从而得到转基因农作物。以转基因生物为直接食品,作为原料加工生产的食品,以及喂养家畜得到的衍生食品,在广义上都可以称为转基因食品。因其安全性被广泛质疑,国际社会对其尚存有很大争议。它的研究已有几十年的历史,但真正的商业化是近十年的事。 90年代初,市场上第一个转基因食品出现在美国,是一种保鲜番茄,这项研究成果本是在英国研究成功的,但英国人没敢将其商业化,美国人便成了第一个吃螃蟹的人,让保守的英国人后悔不迭。此后,转基因食品一发不可收。据统计,美国食品和药物管理局确定的转基因品种已有43种。各路砖家教你机智辨别转基因食品()و̑̑̑̑例如分辨转基因大米的那一段:好吃、好闻的就可能是转基因按照这个逻辑,我这么帅应该是转基因了。ε=ε=ε=(~)~ 王志兴解释,小番

转基因的基础知识

2自然方式重组基因修饰31972年美国斯坦福大学的伯格等将动物病毒SV40的DNA与噬菌体P22的DNA连接在一起,构成了第一批重组体DNA分子,伯格因此获得了1980年诺贝尔化学奖。4转基因产品利用基因工程技术将一种微生物、动物或植物的基因植入另一种微生物、动物或植物中,改变原有生物的基因组,制造出具备新特征的产品,从而使该产品获得它所不能自然拥有的品质。世界上首例基因移植作物是英国1983年培植出的一种含抗生素药类抗性的烟草。 携带GFP基因的小鼠转入β-胡萝卜素的水稻转入GFP基因的细菌6微生物大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、乳球菌、乳杆菌、酿酒酵母、毕赤酵母等植物大豆、马铃薯、玉米、番茄、木瓜、水稻等动物鱼、小鼠、猪、猴、羊等7真正将这一技术发扬光大的保饲橙剂保铃棉二噁英保丰玉米多氯联苯抗农达玉米抗农达大豆农达抗农达棉花8转基因食品是指用转基因生物制造、生产的食品、食品原料及食品添加物等。与对照相比减少农药用量80,并减少用工150个/hm2,以上两者可使每

转基因知识

基国3 转魑作物已人晰秘应川醉疆蕊最:. 皤拳。鞫咚璺童誊ni 怒了转赫匿侔秭的商生化1种檀j莲百萄交舅有32十禹童批准了转蒸因产照进口用手路轴蠲科旃螽运垒砑}典批准了2锥转釜西t肇螗商业化种囊太葛。盖l 聋f鼍毫、|.嘴囊. 嚣嚣置;- 一j I 每篝- . 0 ,乒.1¨孟:。_:、t 一tI 琏0 萄磕菌垒豫转基离信物静接蕾较内,e96卑的一酌}.仁公壤¨年淘增长了为靖静缝诧销各作l籀转麓困种氇比铡2 8! 塑:璺兰。日 型窒竺兰竺=竺

基因治疗基因转移方法

ADpl Med Sc i Today.Aug 1999, V oi 5.No.3 基因治疗基因转移方法 陆东东 G ene tra nsfer method s of g ene thera py L u D on gdon g 基因转移是指用适当手段将外耪c基因导人体外或体 内受体细胞中的分子生物学技术。常用方法可概括为物理、 化学和生物三大类,前两类是非病毒的方i告,生物方法主要 指病毒舟导的基因转移,包括R NA 病毒、DNA 病毒两类,物 理化学{盘携带的遗传物质在细胞内易受 DNA 酶降解,而且 不容易稳定地存在细胞基因组中,坦是这些方法不存在野生 型病毒污染.比较安全.肩毒方i击的特点是基因转移敬率较 高,瞧是安全性阃题需要重视。理想的基因转移方珐应符合 以下要求,(1) 高效的转移率- (2) 外源基因定向导入受体细 胞,且能转导非分裂相的细胞{ (3) 能稳定地、定点整合到宿 主染色体上.最好是同耪c重组{ (4) 较高的安全性.对人体不 构成较严重的危害· (5)容易操作.易推广应用。 l理他方法 基因转移的物理方法包括裸露DNA 直接注射、颗粒轰 击、电穿孔、显微注射等。基因转移化学

转基因育种与方法

作物转基因育种就是根据育种目标,从供体生物中分离目的基因,经DNA重组与遗传转化或直接运载进入受体作物,经过筛选获得稳定表达的遗传工程体,并经过田间试验与大田选择育成转基因新品种或种质资源。转基因作物(GMC,genetically modified crops)与常规育种技术相比,转基因育种在技术上较为复杂,要求也很高,但是具有常规育种所不具备的优势:1.拓宽可利用的基因资源;2.培育高产、优质、高抗优良品种提供了崭新的育种途径;3.可以对植物的目标性状进行定向变异和定向选择;4.可以大大提高选择效率,加快育种进程。此外,还可将植物作为生物反应器生产药物等生物制品。Recombinant Traditional crossbreedingDNA techniques第一节作物的转基因技术一、转基因技术的发展现状自从1983年第一株转基因烟草获得以来,至今已有120种植物转基因获得成功。1996年全球大面积种植,并不断扩大。国际农业生物技术应用服务局(ISAAA)统计结果世界银行下属机构预测,世界范围内转基因作物产业的交易额:2005

简述植物转基因的基本流程

编号:_项目名称:植物转基因基本流程版本号:_1.1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的本文旨在通过详细介绍植物转基因的基本流程,帮助读者了解植物转基因技术的原理和应用,为相关领域的研究和实践提供指导。2.目的基因的获取与鉴定2.1 获取目的基因a.从自然界中筛选具有优良性状的植物,提取其基因组DNA;b.利用PCR技术扩增目的基因;c.通过序列分析确定目的基因的序列。2.2 鉴定目的基因a.利用生物信息学方法分析目的基因的功能和表达调控;b.通过基因表达分析确定目的基因在植物体内的表达水平;c.通过功能验证实验验证目的基因的功能。3.载体构建3.1 选择载体a.根据目的基因的大小和表达需求选择合适的载体;b.考虑载体的安全性、稳定性等因素。3.2 构建载体a.利用限制性内切酶切割载体和目的基因;b.通过DNA连接酶将目的基因连接到载体上;c.验证载体的构建。4.转化方法4.1 农杆菌介导转化b.在含有抗生素的培养基上筛选转化成功的植物细胞;c.将转化成功的植物细胞培养成植株。4.2 基因枪法
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